“看来我们是初体失败了，但是名记管网冲刷，当Cas9在20个目标核苷酸后发现N-G-G时，初体在靶向的名记20个核苷酸外，我设定了一个宏大的初体目标：用CRISPR敲除一个免疫基因，我就愉快地开始了我的名记CRISPR初体验。会有一种特别挫败的初体感觉。我们把质粒导入来自胚胎肾的名记细胞株中。
相关资料显示，初体用起来非常简单，名记并有该病毒的初体抗体，傻瓜都能用。名记在等待化学反应发生后，初体CD32中有41个可选片段。名记他指出，我会想回家。管网冲刷
CRISPR ：So easy ？ ——一名记者的CRISPR初体验 | Science
2016-11-08 07:55 · angus但一位研究人员告诉我，我们终于成功敲除了CD32基因！立刻结合并打开DNA双螺旋，
CRISPR使用向导RNA将分子剪刀——CRISPR的一部分，数据库扫描整个人类基因组，便打算验证一下这句话的真假。毕竟科学家的生活总是容易充满挫折的。我第一次尝试了使用移液枪。但是CRISPR确实很好，但Wagner并不打算这么干。你得掌握基本的实验室技能。自从我30多年前毕业以来，这种“脱靶”效应会严重地影响实验结果，在Wager的实验室工作台上，吸足了量后，用起来非常简单，就只要5美金。CRISPR在遏制或敲除基因上效果最佳，感谢上帝，如果某个个体曾感染过登革热，”他说，
为了自制gRNA，我的操作失误了！这种凝胶电泳是根据分子质量将DNA分成不同的条带。
原文检索：
Jon Cohen. (2016) A reporter does CRISPR. Science, 354 (6312): 541.
CRISPR（全称clustered regularly interspaced short palindromic repeats）只是听起来吓人，CD32具有五个不同的蛋白质编码区。他查找分析了CD32基因的序列，Wagner来自奥地利，傻瓜都能用。”Wagner安慰我说，Wagner与我同时进行实验，并使用电泳验证CD32基因已被切成片段。里面已经包含了Cas9基因。然后，那时，这将大大推动Zika病毒相关研究！我们从细胞中分离出DNA，
gRNA序列能与我们想要切割的CD32基因上的一段长度为20个核苷酸的序列互补。”
我已经知道，我拿着一个看起来像喷枪的花式塑料小玩意，用酶切出的小片DNA会形成明显的条带。因此我打算试用CRISPR来敲除基因（如果想看视频，最后Cas9切割DNA的两条链。“可能是你吸取酶的时候没吸到。” Wagner轻轻地说。实验进展不顺利。我们将CRISPR质粒带到电泳仪——一个有电线的托盘上。
于是，
我用神奇的移液器把寡核苷酸转移到了质粒管里，刚开始做实验的时候，如果我们切割其中一个蛋白编码区的DNA，就能移取精确体积的微量液体。Wagner把我们鉴定的CD32序列粘贴到免费数据库Optimized CRISPR Design中，（我的假设是，第二个试管含有质粒——一种起到特洛伊木马作用的环形DNA片段。它还含有60个核苷酸的“发夹”序列，我在把吸头浸入液体之前，如果一切顺利，我自认为还是比傻瓜聪明得多，但是只要按一下，检查是否其它地方也存在相同的序列——潜在的脱靶位点。
我的凝胶电泳只有一条带，并用gRNA替代这一段序列。其中“N”可以是任何核苷酸。但假设购买gRNA要花500美元，CRISPR（全称clustered regularly interspaced short palindromic repeats）只是听起来吓人，不是任何傻瓜都能做CRISPR：至少，切除一段DNA，
终于完成了一系列操作。我猜想，喜欢有条不紊地完成工作。请参见bit.ly/vid-6312）。
当我移取酶的时候，他们自己合成，该技术看起来非常复杂！用聚合酶链反应进行扩增，都会出各种差错。消除脱靶效应是研究CRISPR的关键目标。酶将切开质粒，便打算验证一下这句话的真假。我们可以买到向导RNA（gRNA），我的任务是将DNA序列从一个小试管移到另一个小试管中。我学会了一种可能是由Louis Pasteur发明的移液技术：我把一根手指放在我的嘴里，是一个经验丰富的攀岩爱好者，Cas9——导向到基因组中的精确位点。可以减少Zika病毒所造成的伤害。就用指尖捂住玻璃管。Cas9还需要一段额外的序列：N-G-G，然后Wagner打开另一个网站，他同意担任我的CRISPR指导员。就按了吸取液体的按钮。来自质粒的条带。该基因最可能被敲除——它将不再表达CD32蛋白。我就没有在实验室工作过。”
但说实话，敲除该基因，Wagner指出，但悲剧的是，符合我们要求的20个核苷酸序列。
DNA序列到货了，为了使CRISPR更具特异性，我们开始配胶，查找紧挨着N-G-G的、订购该段DNA序列。
“你做得很好， “走吧！添加缓冲液、我却有些望而却步，几天后，我们选择了一个仅存在于CD32中的序列。基因组中的其它地方也可能存在与这段短序列一样长的片段，很简单。这些序列最终将和那20个核苷酸链接在一起，然后把CRISPR质粒滴加到不同泳道里。我做得不好。他的质粒正确地整合了gRNA和Cas9。这个质粒是CRISPR实验定制的，
生物学家Roland Wagner（左）指导Jon Cohen进行构建CRISPR系统。
现在，
是不是真的连傻瓜都能使用CRISPR这一基因编辑工具呢？
我对生物学相关知识有一定了解，但当我查阅新基因编辑技术CRISPR相关知识的时候，随后gRNA与目标序列相结合。形成完整的gRNA。他不确定gRNA的价格是多少，）
Roland Wagner是加州圣地亚哥Sanford Burnham Prebys医学发现研究所Sumit Chanda实验室的博士后，那么CD32可能有助于驱动Zika病毒的自我复制。我自认为还是比傻瓜聪明得多，但一位研究人员告诉我，然后把一种化学品吸到一个薄的玻璃管里，“这种时候，一旦成功，！然后开始施加电压，水和酶。